储存液氮罐在实验室生物实验中的应用规范

液氮罐在细胞培养中的一般程序

细胞培养的一般过程主要包括4个步骤：准备、材料提取、培养和个步骤。为了保存细胞，如果细胞株不易突变，则必须使用液氮进行深冷冻。常规液相液氮罐，一般实验室35升125口径储存液氮罐 .，首先对细胞进行处理，将含有保护剂的培养基添加到冷冻管中将需要冷冻的细胞放入管中，使用程序冷却器或冰箱梯度冷却，较后在液氮中长期保存。-在196度的保存条件下，细胞的保存时间几乎是无限的。

目前，美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)液氮冻含有3200个已经鉴定的细胞系(1992)，包括来自正常人和各种疾病患者的近75个皮肤成纤维细胞系和来自不同物种的杂交瘤细胞株。

二、胚胎冷冻保存技术

胚胎冷冻保存技术是指在低温条件下使用低温保护剂保存胚胎的技术。该技术是在20世纪下半叶随着人工授精技术的广泛应用而产生的，已成为现代生命科学研究的必要手段之一。动物胚胎的冷冻保存原理是，低温降低了胚胎中的变质反应速度。细胞保存的温度越低，细胞和生物样品的保存时间就越长。

目前，生物制品细胞胚胎的冷冻保存方法有很多种，包括慢速冷冻、快速冷冻、一步冷冻、直接移植深冷和玻璃冷冻，**级冷冻可以快速冷冻

①将胚胎放在室温下25人％玻璃化溶液(VS中预处理15min；

②将预处理后的胚胎放置在高浓度(75％一90％)的VS液中保存20—40min；

③将两步抗冻剂处理的胚胎直接放入液氮中保存。

菌种、疫苗、骨组织、 也可以用液氮罐保存 等物质能达到良好的长期储存效果

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                               
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